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      通蔚生物帶您了解細胞換液的方式有哪些
      更新時間:2023-11-27   點擊次數:99次

      細胞換液是指去除舊的培養基,換成新的培養基以繼續提供細胞充足的營養支持。當舊培養基 ph 值改變(含酚紅的培養基通常是變酸發黃)時,需要及時進行換液。在培養細胞的過程中,換液是一項非常常規操作,它主要是為了清除細胞在生長過程中產生的各種代謝廢物,補充新鮮的培養基,促進細胞生長。細胞換液主要有全換液和半換液兩種方式,那么,不同方式的換液方法如何更換細胞培養瓶內的溶液呢?


      換液前工作準備

      環境準備:相對密封、防塵、防菌的無菌室


      操作者準備:雙手清潔呈可操作狀態

      物品準備:超凈工作臺、CO2培養箱、裝有75%醫用消毒酒精的酒精噴壺、PBS緩沖液、含血清培養基、巴氏吸管、移液器、廢液缸。


      工作準備:預熱培養基,酒精棉擦拭培養基瓶外表面后移入生物安全柜/超凈工作臺。

      細胞培養箱中取出的細胞,酒精棉擦拭培養瓶/皿外表面,移入生物安全柜/超凈工作臺??梢陨缘却?,待生物安全柜中的循環風將試劑瓶和培養瓶的外表面吹拂幾分鐘后,擰開培養基瓶蓋虛掩,擰開培養瓶瓶蓋虛掩,培養皿蓋不用擰。


      第一種方式:細胞全換液

      如果是貼壁細胞,可以用全量換液法,直接吸去全部舊培養基,補充足量新鮮培養基。


      細胞


      細胞全換液具體步驟

      1.將器材放入超凈臺,打開紫外照射滅菌,若是培養的細胞對溫度比較敏感,可以將含血清的培養基瓶放入37℃的水浴箱使得培養基溫度在37℃,再轉移到超凈臺紫外滅菌。另外,細胞培養間也需要紫外照射半小時左右。


      2.從培養箱取出細胞培養瓶,用酒精噴壺在瓶子表面噴灑75%酒精消毒,轉移到超凈臺,打開蓋子,輕輕吸出舊的培養液,可用移液器加入新鮮含血清培養基,注意一定不要從細胞貼壁面加入培養基,應從側壁加,動作輕柔,以免沖落細胞。


      3.加好培養基后,蓋上蓋子,在瓶子上做標記,注明換液時間,細胞種類,操作人員等信息。


      4.放入培養箱之前應再次用酒精噴一噴瓶子表面,然后應記得整理操作臺,用酒精擦拭超凈臺臺面,清理廢液和垃圾。


      第二種方式:細胞半換液

      “細胞半換液"又稱“細胞半量換液",即棄掉一半舊的培養基,再加一半新的進去。選它的原因其實與前面不加PBS的理由有點相近。


      半換液原因

      1.給細胞提供適應的緩沖環境;

      2.細胞生長過程中可能會分泌某些生長因子,促進生長;

      3.節省材料

      4.方便操作:比如96孔板,換液很麻煩。所以常采用排槍進行半換液;

      5.對于懸浮細胞的培養,有時也會選用半換液減低細胞密度;


      以上是通蔚生物帶您了解細胞換液的方式有哪些,希望可以幫助到大家。上海通蔚生物科技有限公司以質量求生存,細胞以信譽求發展的精神,精益求精,力求做到更好,不管是過去還是現在和將來,全體員工將再接再厲,以的服務態度,全新的精神面貌,為廣大新老客戶,提供的產品和售后服務,讓我們攜手共創美好未來!

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